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PikoGreen dsDNA定量試劑盒(Broad Range)

簡(jiǎn)要描述:PikoGreen dsDNA定量試劑盒(Broad Range)是一種極為靈敏的雙鏈DNA熒光染料,于雙鏈DNA的定量。測(cè)定DNA濃度在cDNA文庫(kù)構(gòu)建、DNA亞克隆、PCR產(chǎn)物估測(cè)等領(lǐng)域中非常重要,另外疫苗等生物制品中殘留微量DNA的檢測(cè)因關(guān)系人身健康,顯得尤為重要。

  • 產(chǎn)品型號(hào):AN54L017/AN54L018
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2024-08-06
  • 訪  問(wèn)  量:2141

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詳細(xì)介紹

品牌其他品牌貨號(hào)AN54L017
規(guī)格200assays供貨周期現(xiàn)貨
應(yīng)用領(lǐng)域生物產(chǎn)業(yè)

產(chǎn)品描述
        PikoGreen是一種極為靈敏的雙鏈DNA熒光染料,僅與DNA雙鏈結(jié)合后才發(fā)出熒光,且所產(chǎn)生的熒光與DNA濃度呈正比,在存在ssDNA、RNA和單體核苷酸的條件下,可以選擇性地檢測(cè)低至25 pg/mL的dsDNA。與傳統(tǒng)DNA定量方法相比,具有如下優(yōu)點(diǎn):

  • 靈敏:數(shù)量級(jí)較UV吸光讀數(shù)更敏感,可節(jié)省樣品。

  • 特異性強(qiáng):只結(jié)合dsDNA,特異性強(qiáng),不受樣品常規(guī)污染影響。傳統(tǒng)紫外吸光法容易受樣品中存在的單鏈DNA,蛋白,RNA等影響。

  • 耐受性好:耐受較高濃度的鹽、尿素、乙醇、氯仿、去垢劑、蛋白或瓊脂糖,可以直接定量PCR擴(kuò)增產(chǎn)物而無(wú)需從反應(yīng)混合物中純化DNA。

  1. 線性范圍寬:PikoGreen dsDNA染料測(cè)定DNA濃度,在100 pg/mL~100 ng/mL范圍內(nèi)呈良好線性。

  2. 方便操作:在樣品中加入染料,染色5~6 min,然后讀數(shù)即可,且適用于96和384孔板。與大多數(shù)基于熒光的酶標(biāo)儀兼容。  

  本產(chǎn)品可適用于各種DNA樣品分析、PCR的分析、芯片樣品、DNA損傷分析、酶活性分析、基因組DNA定量以及復(fù)雜混合物中dsDNA的檢測(cè)和病毒DNA定量等多種領(lǐng)域。

訂購(gòu)信息

產(chǎn)品名稱貨號(hào)規(guī)格
PikoGreen dsDNA定量試劑盒(Broad Range)AN54L017200 assay
PikoGreen dsDNA定量試劑盒(Broad Range)AN54L0181000 assay

產(chǎn)品組分

組分AN54L017(200 assay)AN54L018(1000assay)
A:1×定量緩沖液50 mL250 mL
B:Piko Green Dye 100 × in DMSO反應(yīng)液0.5 mL2.5 mL
C:100×反應(yīng)增強(qiáng)液0.5 mL2.5 mL
D: dsDNA 標(biāo)準(zhǔn)品9 x 0.5 mL(0 , 2, 6.25, 12.5 , 25, 50 , 100, 150 and 200 ng/μL9管(每管0.1 mL)9管(每管0.5 mL)

保存方法
      冰袋運(yùn)輸,4℃避光干燥保存,保質(zhì)期36個(gè)月。如果較長(zhǎng)時(shí)間不用,建議把組分C與組分D放置于-20℃保存。
使用方法

(以96孔板為例)

1.使用前,將產(chǎn)品從儲(chǔ)存條件下取出恢復(fù)至室溫。PikoGreen提供的是DMSO溶液,在4℃存放時(shí)成固體,可37℃水浴溶解。每個(gè)組分應(yīng)充分震蕩或渦旋混勻、離心,以免造成不必要的試劑損耗。

2.分別吸取19.6 mL組分A, 200 μL組分B, 200 μL組分C配制成20 mL1×PikoGreen工作液。新配工作液應(yīng)在1 h內(nèi)使用,工作液存放重新使用時(shí)須重懸,以免染料沉淀,工作液存放24 h,會(huì)輕微影響定量結(jié)果。

3.每個(gè)樣品,吸取200 μL 的工作液至黑色的96孔板微孔中。為確保結(jié)果精確可靠,建議每個(gè)測(cè)試樣品和DNA標(biāo)樣分別做平行的3個(gè)復(fù)孔。

黑色的檢測(cè)板可以減少各測(cè)試樣品間的熒光干擾。

4.96孔板微孔中,分別加入dsDNA標(biāo)樣或待測(cè)樣品各10 μL,并用移液器輕輕混勻。

5.將微孔板室溫避光孵育10分鐘,在Ex(nm):350,  Em(nm):460處用酶標(biāo)儀測(cè)量熒光值。

6.制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算樣品濃度。


注意事項(xiàng)
1.為了得到最佳結(jié)果,請(qǐng)使用精確校準(zhǔn)的移液器和去RNA酶的槍頭、試管以及檢測(cè)板。
2. 建議檢測(cè)時(shí)每個(gè)DNA標(biāo)樣和未知樣品都設(shè)定3個(gè)復(fù)孔。如果檢測(cè)時(shí)不只一塊96孔板,建議每塊96孔板都設(shè)定一條標(biāo)準(zhǔn)曲線,盡量減少檢測(cè)板之間的誤差。

3. 為得到最佳結(jié)果,檢測(cè)板應(yīng)在一小時(shí)內(nèi)讀取完畢。如果將反應(yīng)液重新儲(chǔ)存并在24 h內(nèi)讀取數(shù)據(jù),結(jié)果的精確性會(huì)有輕微損失。











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