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小麥胚芽凝集素,AF488標記

簡要描述:小麥胚芽凝集素,AF488標記是一種與N-乙酰-D-葡萄糖胺和唾液酸結合的凝集素,是綠色熒光中最亮的WGA綴合物。WGA與糖綴合物結合,其衍生物和綴合物被廣泛用于標記細胞膜和纖維化瘢痕組織,用于熒光成像和分析。

  • 產品型號:AC15L012
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2024-08-07
  • 訪  問  量:1684

詳細介紹

品牌其他品牌貨號AC15L012
規(guī)格1 mg供貨周期現(xiàn)貨
應用領域生物產業(yè)

產品描述

  小麥胚芽凝集素,AF488標記(下文簡稱“AF488 WAG"),是一種與N-乙酰-D-葡萄糖胺和唾液酸結合的凝集素,是綠色熒光中最亮的WGA綴合物。WGA與糖綴合物結合,其衍生物和綴合物被廣泛用于標記細胞膜和纖維化瘢痕組織,用于熒光成像和分析。WGA的糖結合特異性與β-1,4-GlcNAc-連接殘基的序列,即幾丁質酶有關。每個單體包含兩個相同的非相互作用的結合位點,它們與3或4β-1,4-GlcNAc單元互補。在所檢測的單糖中,只有GlcNAc與WGA結合。甘露聚糖不結合,而GalNAc只能弱結合。WGA與含有Galβ(1--4)GlcNAcβ(1--3)重復序列(即聚乳糖胺型聚糖)的大寡糖中的內部GlcNAc殘基具有高親和力結合。N-乙酰神經氨酸只參與與WGA的低親和力相互作用。WGA表現(xiàn)出了豐富的糖類特異性結合模式,可用于復雜碳水化合物的結構分析。
訂購信息

產品名稱貨號規(guī)格價格
小麥胚芽凝集素,AF488標記AC15L0121 mg1580

運輸與保存
  藍冰運輸。4℃短期避光保存,有效期3個月;-15℃長期避光保存,有效期12個月。
適用儀器

熒光顯微鏡
激發(fā):FITC濾波片
發(fā)射:FITC濾波片
推薦孔板:黑色透明

使用方法

  1. 溶液配制

AF488 WAG儲備溶液 (200X)配制

  1. 將 500 µL ddH2O 添加到粉末小瓶中,制成 2 mg/mL 的儲備溶液。

【注】:重新配制的儲備溶液可在 4℃ 下短期儲存,或在 -20℃ 下長期儲存。
AF488 WAG工作溶液 (1X)配制
(1)將 5 μL 200X WGA 儲備溶液添加到 1 mL HHBS 緩沖液中。
【注】:不同細胞系的優(yōu)化染色濃度可能不同?;罴毎耐扑]起始濃度為 5-10 µg/mL。

  1. 操作步驟

  活細胞染色

  1. 用 HHBS 緩沖液清洗細胞2次。

  2. 添加 100 µL AF488 WAG工作溶液。

  3. 將細胞與AF488 WAG工作溶液在 37℃ 下孵育 10-30 min。

  4. 用 HHBS 緩沖液清洗細胞2次。

  5. 使用 FITC 濾光片組在熒光顯微鏡上成像細胞。

  固定細胞染色

  1. 在PBS中使用4%的甲醛固定細胞。【注】:對于固定細胞膜染色,建議在沒有透化步驟的情況下進行染色。固定后透化步驟會導致細胞內區(qū)室染色,如高爾基體和內質網 (ER) 結構染色。

  2. 添加 100 µL AF488 WAG工作溶液。

  3. 在室溫下用AF488 WAG工作溶液孵育細胞 10-30 min。

  4. 用 HHBS 緩沖液清洗細胞2次。

  5. 使用 FITC 濾光片組在熒光顯微鏡上成像細胞。

  1. 圖示


         圖 1.
  使用AF488 WAG以 5 µg/mL的濃度在活細胞(Hela細胞) 染色 30 min,然后用Hoechst 33342 *超級純*(貨號:AC12L021)染色。最后使用帶FITC和DAPI濾波片組的熒光顯微鏡成像。
注意事項

  1. 本產品僅限于科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領域。

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